從生物體內(nèi)取出組織或細(xì)胞,在體外(in vitro)模擬體內(nèi)生理環(huán)境,在無(wú)菌、適當(dāng)溫度和一定營(yíng)養(yǎng)條件下,對(duì)這些組織或細(xì)胞進(jìn)行孵育培養(yǎng),使之保持一定的結(jié)構(gòu)和功能,以便于我們觀察研究,這種方法就是細(xì)胞培養(yǎng)(cell culture)。有時(shí)細(xì)胞培養(yǎng)也稱為組織培養(yǎng)(tissue culture),二者可作為同義語(yǔ)使用。
細(xì)胞培養(yǎng)的工作始于20世紀(jì)初目前廣泛應(yīng)用于生物學(xué)、醫(yī)學(xué)的各個(gè)領(lǐng)域,并且是各種細(xì)胞工程技術(shù)的基礎(chǔ)。哈里森( Harrison,1907),因此被稱為“組織培養(yǎng)之父”
培養(yǎng)細(xì)胞的類型及其特點(diǎn)
體外培養(yǎng)細(xì)胞大多培養(yǎng)在瓶皿等容器中,根據(jù)它們是否能貼附在支持物上生長(zhǎng)的特性,可分為貼附型和懸浮型兩大類。
1.貼附型:
大多數(shù)培養(yǎng)細(xì)胞均為貼附型,它們必須貼附在支持物表面生長(zhǎng),這類細(xì)胞在體內(nèi)時(shí)各自具有其特殊的形態(tài),但在體外培養(yǎng)時(shí)貼附于支持物后形態(tài)上表現(xiàn)單一化而失去體內(nèi)原有的某些特征,多呈上皮樣或成纖維細(xì)胞樣。
正常貼附型細(xì)胞的特點(diǎn):
①接觸抑制:正常貼附型細(xì)胞具有接觸抑制的特性,細(xì)胞相互接觸后可抑制細(xì)胞的運(yùn)動(dòng),因此細(xì)胞不會(huì)相互重疊于其上面生長(zhǎng)。
?、诿芏纫种疲杭?xì)胞生長(zhǎng)、匯合成片后,雖發(fā)生接觸抑制,但只要營(yíng)養(yǎng)充分,仍可增殖分裂,但當(dāng)細(xì)胞數(shù)量達(dá)到一定密度后,由于營(yíng)養(yǎng)的枯竭和代謝物的影響,細(xì)胞分裂停止,稱為密度抑制。
腫瘤細(xì)胞的接觸抑制及密度抑制往往減弱或消失,因此細(xì)胞可向三維空間發(fā)展,導(dǎo)致細(xì)胞堆積,并可生長(zhǎng)至較高的終末細(xì)胞密度。
2.懸浮型:
?、偕贁?shù)細(xì)胞在培養(yǎng)時(shí)不貼附于支持物上,而以懸浮狀態(tài)生長(zhǎng),包括一些取自血、脾或骨髓的培養(yǎng)細(xì)胞,尤其是血液白細(xì)胞,以及一些腫瘤細(xì)胞。
②細(xì)胞懸浮生長(zhǎng)時(shí)可以呈單個(gè)細(xì)胞或細(xì)小的細(xì)胞團(tuán),胞體為圓形。
③其優(yōu)點(diǎn)是在培養(yǎng)液中生長(zhǎng),生存空間大,允許長(zhǎng)時(shí)間生長(zhǎng),便于大量繁殖。